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沉淀反应知识点

来源:中公广东卫生人才网 时间:2019-11-05 14:26:56

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首先沉淀反应中用到的抗原多为蛋白质、多糖、血清、毒素等可溶性物质。沉淀反应分为两个阶段:第一阶段为抗原抗体发生特异性结合,几秒到几十秒即可完成,出现可溶性小复合物,肉眼不可见。第二阶段为形成可见的免疫复合物,约需几十分钟到数小时才能完成,如沉淀线、沉淀环。

液体内沉淀试验可分为絮状沉淀实验和免疫浊度法两种。絮状沉淀实验是将抗原与相应抗体混合,在电解质存在的条件下,抗原抗体结合形成肉眼可见的絮状沉淀物。这种沉淀试验受到抗原和抗体比例的直接影响,因而常用作测定抗原抗体反应最适比例的基本测定方法。

操作上可分为三种,分别为抗原稀释法、抗体稀释法和方阵滴定法;免疫浊度法测定的基本原理是在可溶性抗原与相应抗体在两者比例合适时,抗原抗体在特殊缓冲液中快速形成抗原抗体复合物,使反应液出现浊度,如形成的复合物增加,反应液的浊度随之增加。

按仪器设计的不同可分为透射比浊仪和散射比浊仪测定法,按测定方法的不同又可分为速率法和终点法;除此之外还有单向扩散试验,分为试管法和平板法,其中试管法较少采用,而平板法的原理是将抗体或抗血清混入0.9%琼脂糖凝胶内,未凝固前倾注成平板然后在上面打孔,将抗原加入孔中,放37摄氏度让其自由扩散,24~48小时后可见孔周围出现沉淀环,测定环的直径或面积计算标本中待测抗原的浓度。有两种计算方法,分别为M曲线和F曲线。其中M曲线适用大分子抗原和长时间扩散,F曲线适用小分子抗原和短时间扩散。



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